中国HTLV-Ⅰ env基因的克隆及Ⅰ＋Ⅱ型嵌合基因的原核表达与抗原活性检测

• 作者: 夏宁邵 张军 张国忠 徐颖潇 杨海杰 王颖彬 逄淑强
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 人类T淋巴细胞白血病病毒 膜基因 原核表达 抗原
• 年，卷（期）: 2001,（1）
• 页码范围: 38-42
• 页数: 5页
• 分类号: Q781
• 字数: 2959字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-8721.2001.01.008

摘要

为尽快研制出国产HTLV抗体诊断试剂，首先从福建HTLV流行区1名HTLV感染者外周血细胞中克隆出HTLV-Ⅰ的全长膜基因（env），继而结合文献报道、PSA软件的亲疏水性分析和EPI软件的B细胞表位分析数据，选择了gp46中段开始延伸至gp21N端212个氨基酸（aa185～aa396）的基因，并在3′端通过（GlySer）2与人工合成的HTLV-Ⅱ型的型特异性表位区基因嵌合，插入原核表达载体pRSET，在E．coli中得到了高效表达，目的蛋白产量约占菌体总蛋白的30%。通过Triton-X100洗涤，低浓度尿素逐步变性处理，8mol/L尿素溶解后纯度在75%左右，经电泳洗脱纯化，最终纯度可达95%左右，纯蛋白得率约40%。经Westernblotting检测，该蛋白对4份HTLV-Ⅰ型和2份HTLV-Ⅱ型血清均有较强反应，而对4份阴性血清无反应，从而有可能用于研制HTLV抗体诊断试剂盒。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张军	厦门大学细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室	79	725	16.0	23.0
2	王颖彬	厦门大学细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室	4	8	2.0	2.0
3	杨海杰	厦门大学细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室	9	63	5.0	7.0
4	逄淑强	厦门大学细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室	2	54	2.0	2.0
5	夏宁邵		2	34	2.0	2.0
6	徐颖潇	厦门大学细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室	1	5	1.0	1.0