苜蓿基因组DNA提取和RAPD反应条件优选

• 作者: 张文淑 桂枝 袁庆华
• 来源期刊: 草地学报
• 学科: 农学
• 关键词: 苜蓿 DNA提取方法 RAPD 反应条件
• 年，卷（期）: 2001,（2）
• 页码范围: 99-105
• 页数: 7页
• 分类号: S541|Q943
• 字数: 5197字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11733/j.issn.1007-0435.2001.02.005

摘要

采用CTAB法、N2-SDS法、SDS法和改进的CTAB法,提取苜蓿基因组DNA,比较其分离效果.结果表明,改进的CTAB法为最佳提取法.对RAPD反应程序中的一些重要参数进行摸索和优化试验,建立适合苜蓿RAPD分析应用的体系组成为:反应液总体积25 μL,174 ng/μL模板DNA,2.5 μL 10x反应缓冲液,10碱基引物浓度0.1 μmol/L,Taq DNA聚合酶1 U,dNTP浓度0.3 mmol/L,Mg2+浓度2.5 mmol/L.PCR反应循环为:94℃ 4 min,36℃ 30 s,72℃ 1 min;94℃ 30 s,36℃ 30 s,72℃ 1 min,45个循环;72℃延伸10 min.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	袁庆华	中国农业科学院畜牧研究所	114	1720	21.0	34.0
2	张文淑	中国农业科学院畜牧研究所	21	557	12.0	21.0
3	桂枝		2	91	2.0	2.0