大肠癌相关基因ST13的原核表达及鉴定

• 作者: 耿礼仪 邵吉民 郑树
• 来源期刊: 浙江大学学报(医学版)
• 学科: 医学
• 关键词: 肠肿瘤/遗传学 基因表达 序列分析,DNA 重组,遗传 大肠癌 ST13基因 原核表达
• 年，卷（期）: 2001,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 252-255
• 页数: 4页
• 分类号: R730.231|R735.3
• 字数: 3161字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2001.06.003

摘要

目的: 原核表达大肠癌相关基因ST13,并予以鉴定.方法:将ST13 cDNA经PCR扩增和亚克隆,与GST原核表达载体pGEX-4T-2重组,转化E.coli INVαF′菌表达,经Gluta th ione Sepharose 4B亲和层析GST-ST13融合蛋白,再以凝血酶切得到ST13蛋白.结果:限制性酶切和DNA测序表明,ST13cDNA ORF正确克隆于pGEX-4T-2多克隆位点 .经IPTG诱导表达的GST-ST13融合蛋白主要存在于可溶性上清,表达量占大肠杆菌总蛋白2 0%.经亲和层析,每升诱导菌回收融合蛋白2.5 mg,纯度为91.3%.Western-blot证实, 原核表达的ST13蛋白、细胞中天然ST13蛋白的10%SDS-PAGE表观分子量,约50 kD.结论:成功构建了ST13基因原核表达质粒,并大量表达和纯化了ST13蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑树	浙江大学肿瘤研究所	227	2645	27.0	42.0
2	邵吉民	浙江大学医学院基础医学系	18	64	5.0	7.0
3	耿礼仪	浙江大学肿瘤研究所	1	7	1.0	1.0