丙型肝炎病毒包膜蛋白E2可溶性单链可变区抗体在大肠杆菌中的表达

• 作者: 刘妍 夏小兵 成军 施双双 王刚 王琳 钟彦伟 陈菊梅
• 来源期刊: 中国病毒学
• 学科: 医学
• 关键词: 丙型肝炎病毒 包膜蛋白 单链可变区抗体 表达
• 年，卷（期）: 2001,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 220-223
• 页数: 4页
• 分类号: R335
• 字数: 2967字
• 语种: 英文

摘要

利用分子生物学技术,构建表达丙型肝炎病毒(HCV)包膜蛋白E2的人源单链可变区抗体(ScFv)的原核表达载体,并在大肠杆菌JM109中表达可溶性的HCV-E2-ScFv.以重组的HCV E2 蛋白为包被抗原,利用噬菌体抗体库的表面展示技术,筛选到含有HCV-E2-ScFv基因的噬菌体克隆,从噬菌体抗体阳性克隆中提取质粒,经Nco l/Not I酶切鉴定后,该ScFv基因由750bp组成,将其亚克隆到pCANTAB5E载体中,转化大肠杆菌JM109,提取质粒进行DNA序列测定,符合ScFv的基因结构特点.IPTG诱导转化的大肠杆菌JM109,在其培养上清中获得了可溶性HCV E2单链可变区抗体的表达.酶联免疫吸附法(ELISA)证实表达的HCV-E2-ScFv具有与重组HCV E2蛋白的反应活性和特异性,对转化的JM109大肠杆菌上清中表述的HCV-E2-ScFv进行聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE),证实表达的HCV-E2-ScFv的分子量为28kD.为应用HCV-E2-ScFv进行肝组织免疫组织化学和细胞内免疫基因治疗研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王琳	解放军第三○二医院传染病研究所基因治疗研究中心	112	736	13.0	23.0
2	成军	解放军第三○二医院传染病研究所基因治疗研究中心	117	1347	20.0	31.0
3	刘妍	解放军第三○二医院传染病研究所基因治疗研究中心	62	535	12.0	21.0
4	钟彦伟	解放军第三○二医院传染病研究所基因治疗研究中心	33	327	9.0	17.0
5	王刚	解放军第三○二医院传染病研究所基因治疗研究中心	97	707	15.0	23.0
6	陈菊梅	解放军第三○二医院传染病研究所基因治疗研究中心	38	584	13.0	23.0
7	夏小兵	解放军第三○二医院传染病研究所基因治疗研究中心	10	246	7.0	10.0
8	施双双	解放军第三○二医院传染病研究所基因治疗研究中心	14	348	10.0	14.0