油菜叶绿体基因组同源重组片段的克隆及phb基因定点整合载体的构建

• 作者: 宋艳茹 张中林 张景昱 李轶女 沈桂芳 苏宁
• 来源期刊: 植物生理学报
• 学科: 生物学
• 关键词: phb基因 叶绿体转化 同源片段 定点整合 油菜
• 年，卷（期）: 2001,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 235-242
• 页数: 8页
• 分类号: Q78
• 字数: 4837字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1671-3877.2001.03.008

摘要

利用叶绿体基因组在进化过程中高度保守的特点，根据烟草、水稻和玉米叶绿体基因组全序列资料，设计合成引物，PCR扩增并克隆了油菜叶绿体两个重要的功能基因rbcL和atpB（GenBank登录号分别为AF267640和AF267641），并以此作为定点整合外源基因的同源重组片段。以来自叶绿体的强启动子PpsbA和Prrn等驱动PHB合成途径中3个关键酶基因phbA、phbB和phbC，分别构建表达盒，并将它们按照其在原始菌株中的自然转录顺序phbC-phbA-phbB相串联，最后连同选择标记基因aadA表达盒一起，克隆到油菜叶绿体同源片段中，构建成phb基因定点整合载体pRCABZ和pRCABF。酶切及Southern杂交结果证明所构建的转化载体符合预期设计。叶绿体转化及后续工作目前正在进行之中。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	沈桂芳	中国农业科学院生物技术研究所	49	807	17.0	26.0
2	宋艳茹	中国科学院植物研究所	35	1399	20.0	35.0
3	张中林	中国农业科学院生物技术研究所	10	297	8.0	10.0
4	苏宁	中国农业科学院生物技术研究所	26	509	15.0	22.0
5	张景昱	中国科学院植物研究所	8	230	7.0	8.0
6	李轶女	中国农业科学院生物技术研究所	52	364	10.0	17.0