小鼠耳蜗螺旋神经节细胞电压依赖性离子通道的研究

• 作者: Richard J Salvi 丁大连 于宁 孙伟 李兴启 金晓杰
• 来源期刊: 中华耳鼻咽喉科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 耳蜗 螺旋神经节 细胞培养 膜片钳术 动作电位
• 年，卷（期）: 2001,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 178-182
• 页数: 6页
• 分类号: R76
• 字数: 4086字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:1673-0860.2001.03.007

摘要

目的了解小鼠耳蜗螺旋神经节细胞电压依赖性离子通道的特性。方法采用耳蜗螺旋神经节细胞与耳蜗基底膜整体培养和膜片钳全细胞记录方法。结果采用出生后0至5 d的C57BL/10J小鼠(n=30)，耳蜗螺旋神经节细胞与基底膜一道取出，培养8～48 h后，基底膜内侧和周围散落的螺旋神经节细胞贴壁良好，便于进行生理学记录。螺旋神经节细胞根据在电流钳记录下有无动作电位来鉴别，健康的细胞在刺激电流的起始端和结束端均可记录到动作电位。细胞平均静息电位(±s，下同)为(-55±5) mV(n=39)，平均动作电位幅度为(-61±11) mV(n=31)。用电压钳方法在Hank液中可记录到快速的TTX敏感型内向钠电流和TEA、4－AP敏感型外向持续性钾电流，平均电流幅度(±s，下同)分别为(-2.0±1.1) nA(n=39)和(3.0±1.3) nA(n=39)。在含有高浓度钡离子的细胞外液中，阻断钾电流和钠电流后，可记录到幅度为(-1.0±0.7) nA(n=20)的钙电流。部分细胞还记录到大约20次/s的自发性放电（n=4），放电幅度约为2 nA。结论新生小鼠（小于5 d）螺旋神经节细胞可随基底膜一道从耳蜗中分离培养。培养8～48 h后的螺旋神经节细胞活性良好，便于进行生理学记录。达到全细胞记录状态后，大部分细胞可记录到动作电位，电压依赖性钠电流、钾电流和钙电流，部分细胞还记录到自发性放电，放电频率达到活体记录的水平。