人甲状腺过氧化物酶抗原决定簇基因在 E.coli细胞中的表达

• 作者: 何红鹏 吕枚 姬永丽 方佩华
• 来源期刊: 天津医药
• 关键词: 碘化物过氧化物酶 甲状腺 基因表达
• 年，卷（期）: 2001,（12）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 732-735
• 页数: 4页
• 分类号: R5
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-9896.2001.12.010

摘要

目的:探索在E.coli BL21中表达hTPO抗原决定簇片段(AA568～AA874).方法:将hTPO抗原决定簇基因(1 702～2 622,编号相对于起始密码子)连接到表达型载体pGEX-4T-3,构建重组表达质粒.然后转化E.coli Bl21,IPTG诱导表达.表达产物采用亲和层析方法纯化,SDS-PAGE法测定其分子质量,ELISA法鉴定免疫学活性,考马斯亮蓝染色法定量.结果:成功地表达了hTPO抗原决定簇基因.纯化的GST-hTPO融合蛋白分子质量为61.4 ku,hTPO片段分子质量为37.6 ku.以此作为抗原按ELISA法分别与TPOAb阳性血清或阴性血清反应,结果表明GST-hTPO及hTPO片段均与TPOAb特异性结合.纯化的GST-hTPO产量为10 mg/L培养基;hTPO片段产量为1.2 mg/L培养基.结论:利用基因工程技术可获得高纯度的GST-hTPO融合蛋白及hTPO片段,产物具有良好的免疫学活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	方佩华	天津医科大学总医院核医学科	94	705	14.0	22.0
2	吕枚	天津医科大学总医院核医学科	26	95	6.0	8.0
3	何红鹏	天津医科大学总医院核医学科	7	23	3.0	4.0
4	姬永丽	天津医科大学总医院核医学科	1	0	0.0	0.0