短肽库中血管内皮细胞生长因子受体Flt-1拮抗剂筛选条件的改进

• 作者: 孟麟 安平 寿成超 董志伟
• 来源期刊: 北京大学学报医学版
• 关键词: 血管内皮细胞生长因子 血管内皮细胞生长因子受体 噬菌体 内皮,血管 内皮生长因子/拮抗剂和抑制剂
• 年，卷（期）: 2001,（5）
• 所属期刊栏目: 专栏——肿瘤学研究
• 页码范围: 398-401
• 页数: 4页
• 分类号: R966
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1671-167X.2001.05.004

摘要

目的:改进噬菌体肽库的筛选条件,提高筛选阳性率及阳性克隆重复性.使血管内皮细胞生长因子受体Flt-1拮抗剂的筛选更为有效.方法:通过对血管内皮细胞生长因子受体Flt-1的原核表达产物的变性复性处理,获得相对纯化的可溶性Flt-1受体.将该可溶性受体固相化,对噬菌体表达12肽库进行4 ～ 5轮Bio-panning后,挑取单个噬菌斑制备高滴度噬菌体上清.用ELISA法初步鉴定各噬菌体克隆与sFlt-1的特异性结合并测定阳性克隆的DN A 顺序.在Bio-panning过程中增加非特异性蛋白的预吸附,并减少输入噬菌体数量, 再次筛选短肽库.结果:经过第一次筛选,获得了一系列具有一定重复性与同源性的噬菌体克隆. 改进筛选条件后,筛选阳性率由2%提高到8.3%,阳性克隆的重复性也得到显著提高.该高重复阳性克隆的氨基酸顺序与前一次筛选获得的阳性克隆有较高同源性.结论:Bio-panning 条件的改进提高了筛选效率,为不纯蛋白筛选短肽库积累了经验,并为血管内皮细胞生长因子受体拮抗剂的研制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	董志伟	中国医学科学院肿瘤研究所	24	344	10.0	18.0
2	寿成超	北京大学临床肿瘤学院北京市肿瘤防治研究所生物化学与分子生物学实验室	34	78	4.0	7.0
3	孟麟	北京大学临床肿瘤学院北京市肿瘤防治研究所生物化学与分子生物学实验室	13	29	2.0	5.0
4	安平	北京大学临床肿瘤学院北京市肿瘤防治研究所生物化学与分子生物学实验室	1	2	1.0	1.0