利用GFP逆转录病毒标记肿瘤与血管内皮细胞

• 作者: 刘文文 徐萍 李川源 王丰 田毓华 谢匡成 陈霞芳 顾青 黄倩
• 来源期刊: 中国肺癌杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 绿色荧光蛋白(GFP) 逆转录病毒 基因转移
• 年，卷（期）: 2001,（1）
• 所属期刊栏目: 肺癌分子生物学
• 页码范围: 20-24
• 页数: 5页
• 分类号: R73.3|R73.35+1|R73.35+4
• 字数: 3031字
• 语种: 中文

摘要

目的制备携带GFP基因的逆转录病毒，以简便、快速标记活细胞。方法将编码GFP的cDNA片段插入逆转录病毒载体pLNCX构建重组逆转录病毒载体pLNCX-GFP，借助脂质体转染单嗜性及双嗜性逆转录病毒包装细胞，G418筛选抗性克隆，然后利用荧光显微镜选出GFP表达最高的克隆。取含病毒颗粒的上清液感染NIH3T3及多种肿瘤或血管内皮细胞。结果重组逆转录病毒载体pLNCX-GFP转染包装细胞后，包装细胞可表达GFP并产生GFP逆转录病毒。尽管GFP逆转录病毒对动物及人的肿瘤细胞或血管内皮细胞的感染能力各不相同，但由于逆转录病毒能整合进入宿主细胞基因组DNA内，经短期G418筛选后容易获得持续、稳定、高水平表达GFP的阳性细胞。表达GFP的肿瘤细胞仍可在同系动物体内生长并持续表达GFP。结论携带GFP基因的逆转录病毒能简便、快速介导稳定的基因转移，遗传标记多种细胞，比表达质粒等更优越。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	顾青	上海市第一人民医院中心实验室	28	132	7.0	9.0
2	谢匡成	上海市第一人民医院中心实验室	21	201	7.0	14.0
3	王丰	上海市第一人民医院中心实验室	12	63	5.0	7.0
4	田毓华	上海市第一人民医院中心实验室	12	29	3.0	5.0
5	黄倩	上海市第一人民医院中心实验室	19	114	6.0	10.0
6	徐萍	上海市第一人民医院中心实验室	10	33	3.0	5.0
7	刘文文	上海市第一人民医院中心实验室	7	24	3.0	4.0
8	陈霞芳	上海市第一人民医院中心实验室	7	31	3.0	5.0