重组人可溶性CD14在昆虫细胞表达系统中的表达

• 作者: 刘农乐 张杰 王会信 王芳 薛沿宁 郑莉 龙建银
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: CD14 脂多糖 杆状病毒
• 年，卷（期）: 2001,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 184-187
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 2730字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2001.03.008

摘要

BAC-TO-BAC杆状病毒表达系统是一种快速、高效、便捷的表达系统.将人可溶性CD14(sCD14)基因克隆入pFASTBAC1转移质粒中,重组质粒转化DH10BAC感受态细胞,目的基因通过同源重组插入Bacmid DNA中,后者转染sf21昆虫细胞获得重组杆状病毒.利用重组蛋白C-末端的6×His@Tag,经TALON金属螯合色谱将重组病毒感染昆虫细胞获得的无血清培养上清--步纯化得到重组蛋白,计算表明从1 L培养基中可纯化到约8 mg纯度大于95%的重组sCD14蛋白,免疫印迹结果表明重组蛋白具有与抗6×His单抗和抗CD14单抗结合的抗原性.疑胶迁移实验和细胞活性实验表明重组 sCD14蛋白能在体外与LPS结合,并能增强LPS诱导THP-1细胞产生细胞毒性因子.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王芳	军事医学科学院基础医学研究所	27	162	5.0	12.0
2	张杰	军事医学科学院基础医学研究所	26	112	7.0	9.0
3	薛沿宁	军事医学科学院基础医学研究所	19	106	5.0	9.0
4	王会信	军事医学科学院基础医学研究所	36	291	9.0	15.0
5	刘农乐	军事医学科学院基础医学研究所	16	129	4.0	11.0
6	郑莉	军事医学科学院基础医学研究所	1	11	1.0	1.0
7	龙建银	军事医学科学院基础医学研究所	4	34	4.0	4.0