内皮素反义寡聚脱氧核苷酸抑制肾小球系膜细胞增殖

• 作者: 张志文 李美花 谌贻璞
• 来源期刊: 北京大学学报医学版
• 关键词: 寡聚脱氧核苷酸,反义/药理学 内皮缩血管肽类 肾小球 系 膜/药物作用
• 年，卷（期）: 2001,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 532-535
• 页数: 4页
• 分类号: R692.6
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1671-167X.2001.06.012

摘要

目的:应用反义寡核苷酸技术,对培养的人肾小球系膜细胞(glomerular mesan gial cells, GMC)进行内皮素-1(endothelin,ET-1)基因表达的抑制试验,探讨ET - 1基因表达与GMC增殖效应的关系.方法:以阳离子脂质体lipofectin介导的基因转移方法, 将前内皮素原ppET-1的反义寡聚脱氧核苷酸(a ntisense oligodeoxynucleotide,As-ODN ) 及其对照序列正义寡聚脱氧核苷酸(sense oli godeoxynucleotide,Se-ODN)、错配寡聚脱氧核苷酸(mismatch oligodeoxynucleotide,Mi s-ODN) 分别导入GMC. 通过生物素标记的 As-ODN显色反应,观察寡聚脱氧核苷酸的转移效果;用半定量反转录聚合酶链反应(rever s e transcription-polymerase chain reacti on,RT-PCR)检测寡核苷酸链对GMC的ppET- 1 m RNA表达的影响;用放射免疫分析(radio im munoassay,RIA)观察寡核苷酸链对GMC的ET- 1 蛋白分泌的作用;用氮蓝四唑盐(MTT)试验分析寡核苷酸链对GMC增殖的效应.结果:寡核苷酸链被转移入GMC.10 nmol*L-1 As-ODN抑制了GMC的ppET-1 mRNA表达、ET-1蛋白合成和细胞增殖 (各组P<0 .05).结论:特异抑制GMC的ppET-1基因表达能够抑制其增殖,证实GMC 产生的ET-1能刺激GMC自身的增殖,ET-1是GMC自分泌炎症介质之一.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张志文	北京大学基础医学院生理学系	67	496	14.0	20.0
2	谌贻璞	北京大学第一医院肾内科	74	1203	18.0	33.0
4	李美花	北京大学第一医院肾内科	1	1	1.0	1.0