构建转CgA基因反向cDNA片段小鼠模型

• 作者: 刘晓东 吴鹤龄 孙紫清 张崇本
• 来源期刊: 遗传学报
• 学科: 生物学
• 关键词: CgA基因 反义RNA 转基因小鼠
• 年，卷（期）: 2001,（6）
• 页码范围: 493-501
• 页数: 9页
• 分类号: Q754
• 字数: 5051字
• 语种: 中文

摘要

为了制作CgA基因反义RNA转基因小鼠,构建了质粒pCAS2C,并把pCAS2C中完整的反义表达框显微注射入小鼠受精卵的雌原核中,随后将注射过DNA的受精卵移植入假孕鼠的输卵管中.假母所产子一代都用p1和p4引物对鼠尾基因组DNA进行PCR检测,选出2只首建鼠(PCR阳性).首建鼠与正常鼠杂交后得到F1代小鼠,经PCR方法筛选出来的阳性F1代鼠雌雄自交产生F2代.为了检测F2代鼠的基因型,将PCR方法鉴定为阳性的F2代小鼠分别与正常小鼠回交.只有回交后所得后代PCR检测结果全为阳性的F2代个体才是转基因纯合鼠.这样分别得到两只转基因首建鼠的纯合个体.转基因小鼠脑总RNA经RT朠CR反应后可产生300bp的产物,证明转基因小鼠中转入的反义基因已经转录.以上结果说明转入的pCAS2C反义表达框已经整合到转基因小鼠的基因组中并遗传给后代,而且已经转录.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙紫清	北京大学生命科学学院	2	10	2.0	2.0
2	吴鹤龄	北京大学生命科学学院	5	14	2.0	3.0
3	张崇本	北京大学生命科学学院	11	187	5.0	11.0
4	刘晓东	北京大学生命科学学院	13	30	3.0	5.0