小麦农杆菌介导转基因植株的稳定获得和检测

• 作者: Shirley Sato Tom Clemente 叶兴国 徐惠君 杜丽璞
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 小麦 农杆菌 转基因植株 单拷贝整合
• 年，卷（期）: 2001,（5）
• 所属期刊栏目: 作物遗传育种·种质资源
• 页码范围: 469-474
• 页数: 8页
• 分类号: S512.103.54
• 字数: 5382字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0578-1752.2001.05.002

摘要

以预培养4d的小麦幼胚愈伤组织为受体,LB培养基上激活培养3d或AB培养基上激活培养4d,并在WCC培养基中重悬的C58c1农杆菌菌系为供体,将含有目的基因、标记基因的pPTN249、pPTN254、pPTN270、pSIS-GFP等重组DNA质粒转入了小麦,经在含10～50mg/Lgeneticin(G418)、50mg/Lcefotaxime、50mg/Lvancomycin、50mg/L ticillicin选择培养基上多次选择,移栽前利用nptⅡ EISA检测,移栽后利用叶片离体退绿、PCR和Southern blot 4种方法综合检测,共获得了29株转基因植株,转化频率平均为0.82%.在所获得的转基因植株中,单拷贝整合植株占65.52%.研究结果还表明,不同基因型的转化效率显著不同,除了Bobwhite外,笔者也从扬麦l0号获得了转基因植株;ELISA测定值的高低与外源DNA整合的拷贝数有一定关系;初步建立了农杆菌介导稳定转化小麦的技术体系.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	叶兴国	中国农业科学院作物育种栽培研究所	31	1079	16.0	31.0
2	徐惠君	中国农业科学院作物育种栽培研究所	21	849	12.0	21.0
3	杜丽璞	中国农业科学院作物育种栽培研究所	17	697	11.0	17.0
4	Shirley Sato	美国内布拉斯加大学生物技术中心	1	173	1.0	1.0
5	Tom Clemente	美国内布拉斯加大学生物技术中心	1	173	1.0	1.0