筛选用转座子Tn916诱变的具有免疫原性的嗜水气单胞菌蛋白酶缺失株

• 作者: 储卫华 陆承平
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 嗜水气单胞菌 胞外蛋白酶 Tn916诱变
• 年，卷（期）: 2001,（3）
• 页码范围: 244-248
• 页数: 5页
• 分类号: Q813.5
• 字数: 3732字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-0615.2001.03.010

摘要

以携带质粒pAM120(Apr、Tcr/Tn916)的大肠杆菌CG120株为供体菌，与受体菌嗜水气单胞菌J-1株，采用滤膜接合法进行接合转移，在选择平板(含Tc、cfz和脱脂奶)上进行筛选，筛选出6株蛋白酶缺失株(ECPase-)，ECPase-菌株其生长速度，对正常鲫血清的抗性降低，用脱脂奶平板法及底物法检测，蛋白酶产量明显降低。与亲本J-1株相比，突变株致病力降低，对鲫的半数致死量大于108(J-1株对鲫的半数致死量为5×103)。用ECPase-突变株MJ-1株的18h培养物(5×106CFU)接种健康鲫，不产生亲本J-1株引起的病变及死亡。用MJ-I活菌免疫鲫，在第5周产生较高的凝集抗体，且对强毒株J-1的攻击有保护作用。表明蛋白酶是嗜水气单胞菌的一个重要的毒力因子，ECPase-突变株仍具有免疫原性。