细胞内物质转运调节分子ARFGAP3的克隆表达及生化活性

• 作者: 刘晓勤 张成岗 贺福初 邢桂春 陈清棠
• 来源期刊: 生物化学与生物物理进展
• 学科: 生物学
• 关键词: ARFGAP3 细胞内物质转运 ADP核糖基化因子 GTP酶活化蛋白 生化活性
• 年，卷（期）: 2001,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 507-513
• 页数: 7页
• 分类号: Q73
• 字数: 4747字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3282.2001.04.017

摘要

ADP核糖基化因子-GTP酶活化蛋白(ARFGAP)是重要的细胞内物质转运调节分子.在22周孕龄人胎肝cDNA文库中发现一种新基因，其编码的氨基酸序列与大鼠ARF1 GAP有32%同源性.将这种新基因命名为"ARFGAP 3"，对其进行功能研究，利用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)，从人胎盘总RNA中扩增A RFGAP3全长cDNA序列，并将其亚克隆到pGEM-T载体；采用RNA印迹法和斑点杂交法，检测其组织表达谱，发现在多种腺体和睾丸中有很高水平ARFGAP3基因转录，并且只有一种约2.7 kb 的转录本.利用基因重组技术，构建表达质粒pBAD/Thio-ARFGAP3，在大肠杆菌中表达，采用亲和层析法纯化表达产物，利用肠激酶切除重组融合蛋白N端引导序列.检测重组ARFGAP3的生化活性，证实ARFGAP3对ARF1具有GAP活性，促进ARF1结合的GTP水解为GDP，磷脂酰肌醇二磷酸 (PIP2)增强其GAP活性，而磷脂酰胆碱(PC)抑制其GAP活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	贺福初	军事医学科学院放射医学研究所	144	1858	22.0	36.0
2	陈清棠	北京医科大学第一医院神经内科	27	227	9.0	14.0
3	张成岗	军事医学科学院放射医学研究所	123	1156	18.0	28.0
4	邢桂春	军事医学科学院放射医学研究所	10	140	3.0	10.0
5	刘晓勤	军事医学科学院放射医学研究所	2	4	1.0	2.0