PCR结合寡核苷酸探针杂交检测临床常见真菌的实验研究

• 作者: 尹秀云 牟兆钦 陈建魁 黄媛
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 真菌,医学 聚合酶链反应 寡核苷酸探针 生物素
• 年，卷（期）: 2001,（3）
• 所属期刊栏目: 检测技术
• 页码范围: 345-348
• 页数: 4页
• 分类号: R37
• 字数: 3456字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0254-5101.2001.03.038

摘要

目的建立PCR结合生物素标记的寡核苷酸探针斑点杂交技术，鉴定临床常见的真菌。方法首先用真菌通用引物扩增白念珠菌、热带念珠菌、假热带念珠菌、近平滑念珠菌、光滑念珠菌、解脂念珠菌、克鲁斯念珠菌、季也蒙念珠菌、黄曲霉、烟曲霉的核糖体大亚单位基因的保守区序列，然后用生物素标记的种特异性寡核苷酸探针与扩增产物杂交。并将此方法用于临床标本和临床分离菌株的检测。结果通用引物可以扩增上述11种临床常见真菌的DNA，扩增片段长度在260bp左右。9种特异性探针分别与11种真菌标准菌株的PCR扩增产物杂交，结果表明每种探针都具有高度特异性。斑点杂交法和Southern杂交法检测敏感性相同，为100fg；琼脂糖凝胶电泳法检测敏感性为1pg。通过69例临床标本和31例临床分离菌株的检测，PCR-杂交法的结果和真菌培养法的结果基本一致。结论 PCR结合生物素标记的寡核苷酸探针杂交技术可将9种临床常见真菌鉴定到种，方法快速、敏感、特异。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈建魁	军事医学科学院附属医院检验科	91	523	11.0	17.0
2	黄媛	军事医学科学院附属医院检验科	38	235	8.0	13.0
3	尹秀云	军事医学科学院附属医院检验科	60	348	11.0	15.0
4	牟兆钦	军事医学科学院附属医院检验科	14	81	5.0	8.0