双功能逆转录病毒载体介导耐药基因转染人脐血CD34+细胞能增强联合化疗抗性

• 作者: 卢大儒 夏学鸣 王季石 薛京伦 阮长耿 陈子兴
• 来源期刊: 中华医学杂志(英文版)
• 学科: 医学
• 关键词: 基因疗法醛脱氢酶基因(ALDH1)多药耐药基因 (MDR1) 逆转录病毒载体基因共表达造血干细胞脐血
• 年，卷（期）: 2001,（1）
• 所属期刊栏目: ORIGINAL ARTICLES
• 页码范围: 25-29
• 页数: 6页
• 分类号: R3
• 字数: 597字
• 语种: 英文
• DOI: 10.3760/j.issn:0366-6999.2001.01.005

摘要

目的为探讨转染醛脱氢酶基因（ALDH1）和多药耐药基因 (MDR1)的人脐血CD34+细胞能否同吮增强对活性环磷酰胺（4-HC）和P-gp转运泵靶药的抗性。 方法构建了同时含ALDH1和MDR1双耐药基因的逆转录病毒表达质粒G1Na-ALDH1-IRES-MDR1，经LipofectAMINE介导转染GP+E86和PA317包装细胞，采用含长春新碱（VCR）和4-HC的培养基克隆选择后，收集重组病毒上清于单向型与双嗜型包装细胞行乒乓交互感染，获得PA317重组病毒生产细胞（最高滴度达5.6×105?CFU/ml），将含ALDH1和MDR1耐药基因重组病毒上清在细胞生长因子刺激下重复感染人脐血CD34+细胞。 结果经PCR,RT-PCR, Southern blot, Northern blot, FACS和MTT方法检测显示外源ALDH1与MDR1基因已经整合入转染靶细胞中基因组并获得有效表达，同时传递不同的耐药表型。经耐药基因修饰的脐血CD34+细胞对4-HC和P-gp转运泵靶药同时产生抗性，其IC50值分别比未转染细胞高4倍（4-HC）, 5.5倍(柔红霉素-DNR)和7.2倍(VCR)。 结论双功能逆转录病毒载体介导两种不同耐药基因转染人脐血CD34+细胞能增强联合化疗抗性，本基因转移系统的建立为开展肿瘤基因治疗的临床研究奠定了实验基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	卢大儒	复旦大学遗传学研究所	137	982	17.0	25.0
2	阮长耿	江苏省血液研究所苏州医学院附一院血液科	29	275	8.0	16.0
3	薛京伦	复旦大学遗传学研究所	51	228	8.0	13.0
4	陈子兴	江苏省血液研究所苏州医学院附一院血液科	12	52	5.0	6.0
5	夏学鸣	江苏省血液研究所苏州医学院附一院血液科	4	7	1.0	2.0
6	王季石	江苏省血液研究所苏州医学院附一院血液科	2	5	1.0	2.0