巨型引物PCR法对抗CD3改型单链抗体的定点诱变

• 作者: 刘晶 姜述德 尹长城 黄华梁
• 来源期刊: 生物化学与生物物理进展
• 学科: 生物学
• 关键词: 改型单链抗体 定点诱变 PCR 巨型引物 慢速退火
• 年，卷（期）: 2001,（5）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 756-760
• 页数: 5页
• 分类号: Q75
• 字数: 2871字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3282.2001.05.034

摘要

亲和力是影响改型单链抗体应用于临床的重要因素之一.利用巨型引物PCR定点诱变方法,设计并化学合成出两组含多个突变位点的简并引物,在第一轮PCR中使用简并引物分别扩增出含突变碱基的两条特异性的DNA片段,即巨型引物,将其经琼脂糖凝胶电泳分离纯化后,作为3＇和5＇的两端引物应用于第二轮PCR反应中.通过改变标准PCR反应条件,调整引物与模板的浓度,扩增出特异性较强的目的DNA条带.PCR产物经回收后,进行DNA测序.测序结果表明利用该方法扩增得到特异的抗CD3改型单链抗体的突变体库.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	尹长城	中国科学院遗传学研究所	11	64	4.0	8.0
2	黄华梁	中国科学院遗传学研究所	16	158	7.0	12.0
3	刘晶	中国协和医科大学中国医学科学院	2	28	1.0	2.0
4	姜述德	中国协和医科大学中国医学科学院	2	1	1.0	1.0