禽成髓性白血病病毒p27和gag基因的克隆

• 作者: 常建宇 祝晓春 陈福勇
• 来源期刊: 中国兽医杂志
• 关键词: 禽成髓性白血病病毒 gag基因 p27基因 RT-PCR 基因克隆
• 年，卷（期）: 2001,（8）
• 所属期刊栏目: 调查研究
• 页码范围: 8-10
• 页数: 3页
• 分类号: S858.326.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0529-6005.2001.08.002

摘要

禽成髓性白血病是由禽成髓性白血病病毒引起的一种禽白血病(Avian Leukosis).禽成髓性白血病病毒的gag基因具有高度保守性,其编码的群特异性抗原p27是禽白血病病毒所共有的主要核心蛋白,可做为禽白血病的诊断抗原.本实验采用AMV感染鸡胚成纤维细胞(CEF),提取感染细胞总RNA,用随机引物反转录成cDNA,根据已经发表的AMV BAI-A株序列设计两对针对p27基因和gag基因的特异性引物,分别进行PCR,成功地扩出p27基因和gag基因,其片段分别为793 bp和2.1 Kb.以gag基因的PCR产物为模版,采用p27的特异性引物也成功扩出p27片段.分别将p27,gag基因与pGEM-TEasy载体进行连接,转化大肠杆菌,筛选阳性克隆,提取质粒,进行酶切鉴定.对含有p27基因的质粒进行测序,结果证明成功克隆了p27基因,间接证明了2.1 Kb的片段是gag基因.p27和gag基因的成功克隆为该病的探针诊断和gag基因的表达提供了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈福勇		34	288	10.0	15.0
2	常建宇		18	62	5.0	7.0