单纯疱疹病毒胸苷激酶/丙氧鸟苷系统对人骨肉瘤细胞杀伤作用的研究

• 作者: 丘钜世 乔慧 张惠忠 李扬 郑树森
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 骨肿瘤 基因疗法 遗传学
• 年，卷（期）: 2001,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 210-214
• 页数: 5页
• 分类号: R738.1
• 字数: 2893字
• 语种: 中文

摘要

目的：观察单纯疱疹病毒胸苷激酶/丙氧鸟苷(HSV-TK/GCV)基因治疗系统对骨肉瘤细胞株OS732的杀伤作用并研究其作用机制。方法： 构建含HyTK基因的逆转录病毒载体DORHyTK，用DOTAP将其转入骨肉瘤细胞株OS732；提取阳性转染细胞(OS732TK)的DNA和总RNA，分别用PCR和斑点杂交的方法检测转染的效果；用MTT比色法测定OS732TK对GCV的敏感性及旁观者效应；Hoeschst 332258染色，电镜和流式细胞仪分析HSV-TK/GCV系统对OS732TK细胞杀伤作用的机制。结果：成功构建含HyTK基因的重组逆转录病毒载体DORHyTK。OS732TK细胞整合了TK基因并有稳定的转录产物。5 mg/L GCV作用5 d即可杀伤所有OS732TK细胞。旁观者效应在高、低两种细胞密度接种条件下均存在，且前者强于后者。Hoeschst 332258染色及电镜均显示典型的细胞凋亡特征，但也有少量坏死细胞的存在。流式细胞仪分析的结果说明在GCV作用下，OS732TK细胞阻滞于细胞周期的G0-G1期。 结论： HSV-TK/GCV基因治疗系统对骨肉瘤细胞株OS732有很强的杀伤作用，且存在明显旁观者效应。此系统导致了OS732细胞周期的紊乱，引起细胞的凋亡和坏死。HSV-TK/GCV基因治疗系统为骨肉瘤的治疗提供新的思路。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张惠忠	中山医科大学附属肿瘤医院病理科	15	35	3.0	5.0
2	乔慧	中山医科大学病理教研室	5	10	2.0	3.0
3	丘钜世	中山医科大学病理教研室	22	160	8.0	12.0
4	李扬	中山医科大学病理教研室	16	65	5.0	7.0
5	郑树森	中山医科大学病理教研室	5	148	4.0	5.0