鼠源性血管抑素基因转染对人肝癌细胞体内致瘤力的影响及新血管抑制作用

• 作者: 吴静 张德新 杨静华 樊代明
• 来源期刊: 中华消化杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 血管生成 血管抑素 基因转染 肿瘤致瘤力
• 年，卷（期）: 2001,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 583-586
• 页数: 4页
• 分类号: R73
• 字数: 3677字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:0254-1432.2001.10.002

摘要

目的研究血管抑素血管他丁(angiostatin)基因转染人肝癌细胞系HCC7721,对肿瘤细胞体外生长、周期分布、形态以及体内致瘤力的影响,探讨血管抑素的作用机制.方法应用定向克隆技术构建鼠源性血管抑素血cDNA基因真核表达载体pcDNA3.1(+)-angio,酶切鉴定和测序.采用脂质体基因转染技术将真核表达载体导入人肝癌细胞系HCC7721,新霉素G418筛选抗性克隆,设置转染空载体细胞为阴性对照和未转染细胞为空白对照.通过RNA点杂交和流式细胞荧光免疫检测血管抑素的表达,测定细胞生长曲线,计算细胞倍增时间,流式细胞仪检测细胞周期分布.建立动物模型,观察转染前后肿瘤细胞致瘤力的改变.免疫组化检测肿瘤组织微血管密度(MVD)和血管抑素体内表达.结果成功构建带有碱基序列正确的血管抑素基因片段的重组真核表达载体pcDNA 3.1(+)-angio.分别转染脂质体/pcDNA 3.1(+)-angio和脂质体/pcDNA 3.1(+)的实验组,HCC7721肝癌细胞和阴性对照组经G418筛选,30 d后均得到稳定的抗性细胞克隆,空白对照组在筛选1周后全部死亡.实验组HCC7721细胞在体内和体外均表达目的蛋白,而对照组细胞中无表达.与对照组相比,虽然实验组细胞在体外的生长速度和细胞周期分布未发生明显改变,但在体内的致瘤力显著降低,瘤体增长缓慢,平均抑瘤率达47%.肿瘤MVD计数显示,实验组肝癌细胞形成的瘤体组织中MVD明显低于阴性对照组.结论血管抑素不直接影响肝癌细胞HCC7721在体外的生物学特性,但可强烈抑制体内肿瘤的形成,其机制可能是通过抑制肿瘤的新血管生成,间接发挥抑制肿瘤作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨静华	第四军医大学西京医院全军消化病研究所	7	23	2.0	4.0
2	樊代明	第四军医大学西京医院全军消化病研究所	268	1902	21.0	30.0
3	吴静	第四军医大学西京医院全军消化病研究所	9	74	6.0	8.0
4	张德新	第四军医大学西京医院全军消化病研究所	15	84	5.0	8.0