亲和色谱法从融合蛋白GST-IL-6中纯化重组人白细胞介素-6

• 作者: 吴蕾 林峰 甘一如 黄鹤
• 来源期刊: 天津大学学报(英文版)
• 学科: 生物学
• 关键词: 亲和纯化 人白细胞介素-6 融合蛋白 GST
• 年，卷（期）: 2002,（2）
• 页码范围: 106-109
• 页数: 4页
• 分类号: Q51
• 字数: 410字
• 语种: 英文

摘要

研究用亲和融合谷胱甘肽-S-转移酶(GST)的方法纯化重组人白细胞介素-6(IL-6)的发酵和纯化工艺,使用含有质粒pHZl818的E.coli JMl09在2XYT培养基中进行发酵表达,IL-6表达为与谷胱甘肽-S-转移酶(GST)融合的融合蛋白GST-IL-6.融合蛋白存在可溶的活性蛋白和不可溶的包含体两种形式,此包含体无活性且无法复性,无法用亲和层析回收,通过实验优化摇床发酵的诱导温度和转速,以增加可溶融合蛋白的表达.菌体超声破碎液后,上清液用作亲和柱层析,可将融合蛋白提纯至800  0,每升发酵液可得10 mg融合蛋白,用凝血酶裂解处理6 h,亲和标志物GST被特异性切除,裂解得到的IL-6用离子交换柱层析可纯化至950  0,MTT法测得纯化的IL-6生物学活性为1.02×108 IU/mg.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴蕾	天津大学化工学院	15	150	7.0	12.0
2	黄鹤	天津大学化工学院	21	140	8.0	11.0
3	甘一如	天津大学化工学院	42	391	13.0	17.0
4	林峰	天津大学化工学院	2	0	0.0	0.0