可直接克隆PCR产物的克隆载体的构建

• 作者: 徐红梅 李晶泉 胡学军 袁晓东 赵东利
• 来源期刊: 遗传
• 学科: 生物学
• 关键词: T-载体 pUC118 PCR产物 限制酶Eam1105 I
• 年，卷（期）: 2002,（2）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 177-178
• 页数: 2页
• 分类号: Q81
• 字数: 1554字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0253-9772.2002.02.018

摘要

本文描述一种构建与PCR产物直接连接的克隆载体的方法.以高拷贝克隆载体pUC118为骨架载体,在pUC118质粒氨苄抗性基因的Eam1105 I 酶切位点上,以点突变的方式封闭Eam1105 I 酶切位点.经转化大肠杆菌JM109证实,该改造过的pUC118质粒,可使宿主细胞仍具有氨苄抗性.将一人工合成的具有两个Eam1105 I 酶切位点的互补寡聚核苷酸链(两端具有BamH I 接头)插入已封闭Eam1105 I 酶切位点的pUC118*载体的BamH I 位点,构成新的克隆载体,此质粒命名为pUC118E.该载体经Eam1105 I 酶切后,可产生3′末端突出一个T碱基的T-载体,能与PCR产物直接连接.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵东利	大连大学医学院生物教研室	25	247	8.0	15.0
2	胡学军	大连大学医学院生物教研室	15	40	4.0	5.0
3	徐红梅		23	216	9.0	14.0