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从单个细胞扩增靶基因片段的技术
从单个细胞扩增靶基因片段的技术
作者:
刘敬忠
王立荣
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
巢式聚合酶链反应
基因扩增
单细胞
摘要:
目的建立从人的单个细胞扩增特定靶基因片段进行基因诊断的技术.方法利用显微操作技术挑取单个纤维母细胞,各置于0.2 ml簿壁反应管的裂解液中,合成针对抑癌基因P53第5~9外显子(e)的引物,运用15mer高度随机引物或一个特异引物进行单个细胞的整个基因组DNA或特异靶片段的预扩增,再以其为模板进行巢式聚合酶链反应(PCR)扩增P53基因第e5~9的1 900 bp片段及含第5,6外显子的580 bp片段.并用ABI-377测序仪测定其序列.结果运用稀释至0.01 ng的基因组DNA扩增1 900 bp片段,优化PCR的条件.分别从30个单个纤维母细胞扩增上述1 900 bp片段,10个获得1 900 bp片段,成功率为33%.扩增580 bp片段,则阳性率可达60%.序列分析证明确为人P53基因第5,6外显子序列.结论运用本实验室建立的技术可从人的单个细胞扩增特定靶基因片段,并测定其序列,作出基因诊断.
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内容分析
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文献信息
篇名
从单个细胞扩增靶基因片段的技术
来源期刊
中华检验医学杂志
学科
医学
关键词
巢式聚合酶链反应
基因扩增
单细胞
年,卷(期)
2002,(2)
所属期刊栏目
论著
研究方向
页码范围
85-87
页数
3页
分类号
R446
字数
3049字
语种
中文
DOI
10.3760/j:issn:1009-9158.2002.02.007
五维指标
作者信息
序号
姓名
单位
发文数
被引次数
H指数
G指数
1
刘敬忠
首都医科大学附属北京朝阳医院基础医学研究中心
56
533
12.0
21.0
2
王立荣
协和医科大学基础医学院病理生理学研究室
1
2
1.0
1.0
传播情况
被引次数趋势
(/次)
(/年)
引文网络
引文网络
二级参考文献
(0)
共引文献
(0)
参考文献
(6)
节点文献
引证文献
(2)
同被引文献
(2)
二级引证文献
(3)
1990(4)
参考文献(4)
二级参考文献(0)
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参考文献(1)
二级参考文献(0)
1998(1)
参考文献(1)
二级参考文献(0)
2002(0)
参考文献(0)
二级参考文献(0)
引证文献(0)
二级引证文献(0)
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引证文献(1)
二级引证文献(0)
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引证文献(0)
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2012(1)
引证文献(1)
二级引证文献(0)
2016(1)
引证文献(0)
二级引证文献(1)
研究主题发展历程
节点文献
巢式聚合酶链反应
基因扩增
单细胞
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中华检验医学杂志
主办单位:
中华医学会
出版周期:
月刊
ISSN:
1009-9158
CN:
11-4452/R
开本:
大16开
出版地:
北京市西城区宣武门东河沿街69号
邮发代号:
2-71
创刊时间:
1978
语种:
chi
出版文献量(篇)
7229
总下载数(次)
38
总被引数(次)
76070
相关基金
北京市自然科学基金
英文译名:
Natural Science Foundation of Beijing Province
官方网址:
http://210.76.125.39/zrjjh/zrjj/
项目类型:
重大项目
学科类型:
期刊文献
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