Alpha珠蛋白基因片段表达载体的构建

• 作者: 余升红
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 聚合酶链反应 逆病毒表达载体 重型beta地贫基因治疗
• 年，卷（期）: 2002,（1）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 20-21
• 页数: 2页
• 分类号: Q789
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2002.01.012

摘要

目的:构建alpha珠蛋白基因片段反义表达载体,抑制重型beta地贫患者alpha珠蛋白基因的过量表达,为重型beta地贫基因治疗打下基础.方法:采用PCR扩增alpha珠蛋白基因片段807bp,反应条件94℃30s,68℃1min,72℃2min,35个循环,然后将所扩增片段用Klenow大片段酶补平PCR产物末端,另外用HindⅢ酶切pLNSX,用Klenow补平后,与补平末段的PCR产物平端连接,转化用CaCl2制备的感受态细菌受体DH5α,用碱法提取所得克隆子质粒,电泳比较质粒大小,再用PCR初筛,最后用双酶切进行鉴定.结果:经过质粒大小比较,PCR初筛,双酶切鉴定,得到6个正向插入重组子.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	余升红	中山医科大学医学遗传教研室	2	0	0.0	0.0