基因打靶载体选择标记盒的构建及表达

• 作者: 孙怀昌 张磊 陈刚
• 来源期刊: 扬州大学学报(农业与生命科学版)
• 学科: 生物学
• 关键词: 基因打靶载体 选择标记盒 聚合酶链反应 表达
• 年，卷（期）: 2002,（2）
• 页码范围: 21-23
• 页数: 3页
• 分类号: Q78
• 字数: 2407字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-4652.2002.02.006

摘要

为构建山羊乳腺基因打靶载体的选择标记盒,将loxP位点分别引入正、反向引物,以含新霉素磷酸转移酶(neo)基因的质粒pTarget为模板,用高保真聚合酶链反应(PCR)扩增得loxP-neo-loxP选择标记盒.将PCR产物克隆到pGEM-T载体后进行的序列分析结果显示,引入的loxP位点及扩增后的neo基因序列均是正确的.将此选择标记盒克隆到不含neo基因的真核表达载体ΔpTarget后转染COS-1细胞,经过G418筛选获得药物抗性细胞克隆.再将此选择标记盒克隆到山羊β-乳球蛋白基因打靶载体并转染山羊成纤维细胞,经过G418选择后也获得抗性细胞克隆.结果表明: 克隆的loxP-neo-loxP选择标记盒可用于基因打靶载体的构建.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙怀昌	扬州大学畜牧兽医学院动物医学系	138	1042	15.0	25.0
2	张磊	扬州大学畜牧兽医学院动物医学系	33	388	7.0	19.0
3	陈刚	扬州大学畜牧兽医学院动物医学系	108	1407	19.0	34.0