用长距PCR法构建恶性疟原虫cDNA表达文库

• 作者: 侯禹男 傅作申 单成启 古稀波 张玉静 李英 程远国 阮承迈 陈泽建 陈知航
• 来源期刊: 热带医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 恶性疟原虫 长距PCR cDNA表达文库
• 年，卷（期）: 2002,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 225-229
• 页数: 5页
• 分类号: R382.31
• 字数: 3440字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-3619.2002.03.004

摘要

目的构建恶性疟原虫cDNA表达文库.方法 用Trizol试剂盒提取总RNA,以经修饰的SMART寡聚核苷酸引物-CDSⅢ引物直接用总R NA选择性地反转录成单链cDNA,再用长距PCR(LD)方法选择性地扩增出双链cDNA,经蛋白酶K 消化和酶切后,用玻璃奶试剂盒回收200bp以上DNA片断,经与载体λTriplEX2连接和蛋白抽提物体外包装后,构建成cDNA文库并对文库进行了初步的鉴定.结果构建了高滴度,高重组率的恶性疟原虫cDNA表达文库.结论所构建的疟原虫cDNA文库适合进一步筛选抗疟原虫药物结合蛋白基因.