人胚大脑皮层神经元细胞体外培养方法的建立

• 作者: 彭亚琴 晏雪生 民安萍
• 来源期刊: 中国自然医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 胚胎 大脑皮层 神经元 细胞培养
• 年，卷（期）: 2002,（4）
• 所属期刊栏目: 方法研究
• 页码范围: 225-226
• 页数: 2页
• 分类号: R3
• 字数: 1590字
• 语种: 中文

摘要

目的建立人胚大脑皮层神经元的培养体系,研究神经元细胞的生长发育过程.方法取妊娠30余周合法流产死亡4 h以内的胎儿之大脑皮层额部组织,用胰蛋白酶消化为单细胞悬液.以2×106/ml密度接种于96孔培养板,24h后加入DNA抑制剂阿糖胞苷,培养1～12 d,用相差显微镜观察神经元生长情况.并以尼氏体染色鉴定神经元,以台盼蓝拒染法细胞计数估算细胞的存活率.结果神经细胞生长良好,胞体折光性强,神经突起明显,细胞形态清晰.第5天形成较稠密的网络联系;细胞存活率逐步下降,第3至第5天显著下降.由92.3%降至76.9%,以后趋于稳定.第7天为74.26%.尼氏小体染色第7天阳性率为88.25%.结论体外培养3～5 d的神经细胞属发育期;第5天细胞稳定生长;第6天神经细胞基本发育成熟.