乙肝病毒核心蛋白人源单链抗体在大肠杆菌中的表达

• 作者: 成军 李克 李莉 王刚 钟彦伟 陈新华 陈菊梅
• 来源期刊: 免疫学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 乙型肝炎核心蛋白 单链可变区抗体 可溶性表达
• 年，卷（期）: 2002,（2）
• 所属期刊栏目: 基础免疫学
• 页码范围: 85-88
• 页数: 4页
• 分类号: Q58
• 字数: 2985字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-8861.2002.02.002

摘要

目的获得可溶性的抗乙型肝炎病毒(HBV)核心蛋白(core )的人源单链可变区抗体(ScFv),为得到纯度高、活力强的HBc- ScFv和进一步的抗HBV 治疗奠定基础.方法采用噬菌体表面展示技术,以重组的HBV核心蛋白为包被抗原,从噬菌体单链可变区抗体库中经过5轮"吸附-洗脱-扩增"筛选过程,获得抗原结合活性较强的乙型肝炎核心蛋白人源单链可变区抗体ScFv 片段克隆,并对其进行DNA序列及免疫活性测定.从噬菌体抗体阳性克隆中提取质粒转化大肠杆菌HB2151,IPTG诱导表达乙型肝炎核心蛋白可溶性人源单链可变区抗体,ELISA和western blot检测其抗原结合特异性. 结果克隆了乙型肝炎核心蛋白的单链可变区抗体基因;经DNA酶切和序列分析表明,该抗体基因由771个碱基组成;ELISA 和western blot结果表明:在大肠杆菌HB2 151中经IPTG诱导表达的可溶性乙型肝炎核心蛋白的单链可变区抗体,具有结合乙型肝炎核心蛋白的特异性和免疫活性.结论克隆、鉴定并在大肠杆菌HB2151中表达了可溶性的HBc- ScFv.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈菊梅		38	584	13.0	23.0