中国小型猪肝细胞cytodexTM3微载体培养及其功能

• 作者: 刘敬超 张冰 李保森 游绍莉 王敏 王永刚 王福生 辛绍杰 邢汉前 邹正升
• 来源期刊: 世界华人消化杂志
• 学科: 医学
• 年，卷（期）: 2002,（12）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1376-1380
• 页数: 5页
• 分类号: R57
• 字数: 4764字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-3079.2002.12.004

摘要

目的:研究原代小型猪肝细胞微载体培养方法的建立、肝细胞功能特性及其安全性.方法:将3.20×107个的肝细胞及2 g/L cytodex TM 3微载体连同40 mL含100 mL/L Hyclone小牛血清及其他附助因子的RPMi 1640培养基加入250 mL已硅化的方瓶中培养.对不同培养时间的肝细胞进行形态学观察.司时测定不同培养时期肝细胞生物合成及生物转化功能,并对培养上清进行质控实验.结果:肝细胞产量为6.8×109--8.1×109(7.58±0.57)×109/肝;肝细胞活率为92-99%(96±3%);肝细胞具有正常肝细胞的超微结构特征;接种培养后肝细胞呈明显的朝Cytodex TM 3聚集,二者易相粘贴,黏附在微载体上的肝细胞增生生长较旺盛;当肝细胞数为3.20×107个时,接种后24h肝细胞尿素及白蛋白的合成量分别为1.22 mm01/L及0.075 g/L;随着时间的延长,利多卡因的转化率逐渐增加,在24 h时即达到100%;培养上清需氧、厌氧、真菌培养、支原体检查及热源实验均为阴性.结论:使用微载体培养的小型猪肝细胞具有较旺盛的增生生长能力、良好的生物转化及生物合成功能,同时又是安全可靠的,可作为体外生物人工肝较为理想的细胞来源.