重组型半胱天冬酶-3真核表达质粒的构建及其在胰腺癌细胞中的表达

• 作者: 严律南 刘志国 王剑利 王炜 秦兆寅
• 来源期刊: 中华实验外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 脱噬作用 癌,胰腺 基因治疗
• 年，卷（期）: 2002,（6）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 555-556
• 页数: 2页
• 分类号: R735
• 字数: 2235字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:1001-9030.2002.06.033

摘要

目的构建重组型半胱天冬酶-3(Caspase-3)基因,观察其对胰腺癌细胞的促凋亡活性,寻求胰腺癌基因治疗新靶点. 方法聚合酶链反应(PCR)克隆野生型Caspase-3大、小亚基(LS、SS);体外重组构建大、小亚基排序颠倒的重组型Caspase-3基因,将其克隆致质粒载体pcDNA3.1(+)中,经脂质体瞬时转染人胰腺癌细胞株,逆转录(RT)-PCR检测其表达;倒置显微镜,DNA电泳,流式细胞仪(FCM)检测其凋亡诱导活性. 结果序列分析PCR证实重组型Caspase-3小亚基位于大亚基之前;转染之胰腺癌细胞RT-PCR(反转录可扩增出894 bp大小片段.转染32 h时见细胞减少,碎片增多,结构破坏和无序;DNA电泳见典型的云梯状条带;流式细胞学出现明显凋亡峰.结论重组型Caspase-3可诱导胰腺癌细胞凋亡,可作为胰腺癌基因治疗的目的基因.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	秦兆寅	西安交通大学附属第二医院普外科	52	219	10.0	12.0
2	刘志国	第四军医大学西京医院消化科	34	121	6.0	8.0
3	严律南	四川大学华西医院普外科	326	1652	17.0	25.0
4	王炜	四川大学华西医院普外科	30	258	8.0	15.0