采用蛋白质工程技术将αB-晶状体蛋白导入心肌细胞的初步研究

• 作者: 刘双 尢家 王慷慨 肖卫民 肖献忠 蒋磊 袁灿
• 来源期刊: 生物化学与生物物理进展
• 学科: 医学
• 关键词: αB-晶状体蛋白 蛋白质工程 膜移位序列 心肌细胞
• 年，卷（期）: 2002,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 283-287
• 页数: 5页
• 分类号: R362
• 字数: 2949字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3282.2002.02.024

摘要

为将αB-晶状体蛋白(αB-crystallin, αB-C)导入心肌细胞,采用蛋白质工程技术将人αB-晶状体蛋白全长cDNA基因克隆至具有细胞膜通透能力的膜移位序列 (membrane-translocating sequence,MTS)的碱基顺序的下游,在大肠杆菌中表达谷胱甘肽5-转移酶(GST)-M TS-αB-C融合蛋白.用谷胱甘肽-Sepharose4B亲和层析分离表达产物,用Xa因子将其中GST 切除,并通过阴离子交换层析纯化MTS-αB-C.纯化的MTS-αB-C在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)上呈单一条带,分子质量23 ku;免疫印迹显示GST-MTS-αB-C与MTS-αB-C均能为人αB-C抗体识别而在相应位置出现清晰条带.GST-MTS-αB-C与MTS-αB-C均有分子伴侣活性.用异硫氰荧光素(FITC)标记的MTS-αB-C与心肌细胞共培养后,在荧光显微镜下观察到其进入了心肌细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	肖献忠	中南大学湘雅医学院病理生理学教研室	130	772	14.0	18.0
2	蒋磊	中南大学湘雅医学院病理生理学教研室	17	109	6.0	10.0
3	王慷慨	中南大学湘雅医学院病理生理学教研室	46	269	8.0	13.0
4	肖卫民	中南大学湘雅医学院病理生理学教研室	20	210	9.0	13.0
5	刘双	中南大学湘雅医学院病理生理学教研室	10	47	3.0	6.0
6	袁灿	中南大学湘雅医学院病理生理学教研室	16	107	7.0	9.0
7	尢家	中南大学湘雅医学院病理生理学教研室	1	1	1.0	1.0