猪β2-AR基因重组质粒的快速筛选

• 作者: 刘红林 周光宏 陈勇
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 农学
• 关键词: 快速 筛选 β2-肾上腺素能受体基因 阳性克隆 猪
• 年，卷（期）: 2002,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 5-6
• 页数: 2页
• 分类号: S813.3
• 字数: 2018字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2002.05.004

摘要

为建立一种高效快速鉴定重组质粒的实验方法.将猪β2-肾上腺素能受体(β2-AR)基因与pET-32C重组,构建β2-AR基因表达载体pET32CAR.以T7启动子引物和猪β2-肾上腺素能受体基因特异性引物为PCR引物,挑取重组质粒转化单菌落直接进行PCR.产物经电泳发现,5个候选克隆中有3个克隆扩增出了一条约2kb的特异性条带,并且插入方向正确.随机选取其中1个克隆用限制性酶切鉴定以及DNA测序验证PCR筛选的正确性.研究结果表明:在采用PCR方法对重组克隆进行鉴定时,可以直接使用细菌菌落参与反应,而无须提取克隆的DNA.与传统的实验方法相比,筛选的时间缩短至3～4h,大大提高了重组DNA的筛选效率.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘红林	南京农业大学动物科技学院	116	1257	21.0	30.0
2	周光宏	南京农业大学动物科技学院	583	11626	50.0	71.0
3	陈勇	新疆农业大学动物营养实验室	70	383	12.0	14.0