内皮细胞生长因子表达质粒的构建及其促进烫伤愈合的研究

• 作者: 付小兵 孙丹 孙同柱 孙小庆 盛志勇 赵志力 陈伟
• 来源期刊: 中华实验外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 细胞因子 烧伤 伤口愈合 表达载体
• 年，卷（期）: 2002,（2）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 144-146
• 页数: 3页
• 分类号: R64
• 字数: 2378字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:1001-9030.2002.02.018

摘要

目的构建血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达质粒,并观察其表达产物对小型猪深度烫伤创面影响.方法应用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术克隆VEGF基因的cDNA序列,并将其正向连接到表达载体pQE-40上,通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹方法对其表达产物进行特异性鉴定.猪小面积深Ⅱ度烫伤后,立即将含有1μg/g的VEGF膏剂均匀涂于创面,每个创面200mg膏剂,隔日换药1次,至伤后11d.用透明膜描记称量法记录创面面积,并取创面组织作组织学检测.结果克隆出的VEGF基因cDNA片段由380bp组成,包括翻译起始密码子、编码序列和终止密码子等部分.重组表达质粒pQE-VEGF在M15细菌体内能够表达,VEGF主要存在于细菌包涵体内.小型猪烫伤后7d,VEGF处理的伤口处肉芽组织增生明显,毛细血管数量增多.烫伤11d后,VEGF组的创面可见连续的上皮覆盖,而M15组的创面面积为(0.71±0.23)cm2,伤口仍未愈合,两者差异有非常显著性(P<0.01).结论构建的VEGF表达载体可以编码VEGF121蛋白,其表达产物能够诱导肉芽组织生长,加速新生血管形成,促进创面愈合.