电穿孔法介导醛脱氢酶基因与多药耐药基因的转移和表达

• 作者: 傅建新 国风 夏学鸣 岑建农 王玮 阳小卫 陈子兴
• 来源期刊: 癌症
• 学科: 医学
• 关键词: 电穿孔 基因转移 醛脱氢酶基因 多药耐药基因
• 年，卷（期）: 2002,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 138-141
• 页数: 4页
• 分类号: R73-36
• 字数: 3262字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-467X.2002.02.006

摘要

背景与目的:将不同类型的耐药基因同时导入造血细胞,以扩大耐药范围和进行体内选择是基因治疗的重要策略,这类载体基因片段较长,进行基因转移有一定的难度.本研究旨在寻找安全有效的长片段基因转移途径.方法:将携带不同类型的耐药基因醛脱氢酶基因(ALDH1)和多药耐药基因(MDR1)的逆转录病毒载体G1Na-AIM以NdeI酶切线性化,电穿孔法转导PA317细胞,经长春新碱(VCR)和4-氢过氧化环磷酰胺(4-HC)选择后,应用Southern blot法确定原病毒的整合,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和流式细胞术(FCM)分析转移基因的表达,筑巢式聚合酶链反应(nested PCR)检验转移系统的安全性.结果:电穿孔法有效介导了ALDH1与MDR1基因的同时转移,Southern blot法证实ALDH1与MDR1基因稳定整合至宿主细胞基因组,RT-PCR检测到转移基因的转录,FCM测定下游基因MDR1蛋白表达增高4倍,转导率达98%.nested PCR未检测到辅助病毒(env).结论:电穿孔法安全有效地介导了ALDH1与MDR1基因的共转移和高表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	岑建农	苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所	91	384	11.0	13.0
2	傅建新	苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所	30	157	7.0	11.0
3	王玮	苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所	57	230	9.0	12.0
4	国风	苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所	20	79	5.0	8.0
5	夏学鸣	苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所	30	159	7.0	10.0
6	阳小卫	苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所	8	48	3.0	6.0