逆转录病毒介导的牛生长激素基因转染NIH3T3细胞和人胚肺成纤维细胞

• 作者: 何屏 宋诗铎 方晖 李为 祁伟 郑东钧 隋志芳 魏殿军
• 来源期刊: 天津医药
• 关键词: 逆转录病毒科 生长激素 成纤维细胞 动物 牛 人类学 肺 胚胎学 细胞学
• 年，卷（期）: 2002,（2）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 94-97
• 页数: 4页
• 分类号: R37
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-9896.2002.02.011

摘要

目的:以牛生长激素(bGH)为模型,建立逆转录病毒载体转移系统,体外转染鼠成纤维细胞株NIH3T3和人胚肺成纤维细胞2BS,以获得bGH表达.方法:将PCR扩增的bGH基因片段插入逆转录病毒载体pSXLC-MDR相应酶切位点,获得的重组逆转录病毒质粒.应用脂质体方法转染重组质粒进入包装细胞PA317,筛选长春新碱抗性克隆株,收集上清液感染NIH3T3细胞和人胚肺成纤维细胞2BS,筛选携带bGH基因的成纤维细胞的克隆株3T3bGH和2BS/bGH.结果:RT-PCR分析表明基因转染组的3T3/bGH细胞和2BS/bGH细胞在相当于680bp处有一清晰的条带,而空质粒对照组无相应条带出现.RIA分析表明转染基因细胞的培养液及胞浆蛋白有bGH蛋白表达,而作为对照的3T3/mdr细胞和NIH/3T3细胞均无此蛋白表达.结论:应用逆转录病毒IRBS载体系统转染bGH基因进入成纤维细胞,该系统易筛选,转染效率较高.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	魏殿军		119	577	11.0	16.0
2	隋志芳	天津医科大学泌尿研究所	4	4	2.0	2.0