重组人乙酰胆碱受体α亚基的克隆及初步表达

• 作者: 李卓玉 王雅梅 郭晨云 霍青虹
• 来源期刊: 山西大学学报(自然科学版)
• 学科: 生物学
• 关键词: AchR pET32 M 克隆 表达 包涵体
• 年，卷（期）: 2002,（4）
• 页码范围: 347-349
• 页数: 3页
• 分类号: Q81
• 字数: 1899字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-2395.2002.04.019

摘要

为获得高表达的人乙酰胆碱受体(human acetylcholine receptor,AchR)α亚基蛋白,根据已知的乙酰胆碱受体α亚基序列,设计并合成了一对引物,以含乙酰胆碱受体a亚基DNA的重组质粒pUC-AchR为模板,应用PCR技术,扩增乙酰碱受a亚基的片段.将该扩增片段与载体pET32 M分别用BamHI/HindIII双酶切,然后在T 4DNA连接酶作用下,将乙酰胆碱受体a亚基片段插入载体pET32 M中,且与载体中的硫氧还蛋白(约14 kD)基因融合.重组质粒pET32 M-AchR含T7启动子,为IPTG诱导型.经双酶切鉴定,序列测定及工程菌初步表达分析,表明获得了正确的重组质粒pET32 M-AchR,且在大肠杆菌BL21中有明显表达,硫氧还蛋白-乙酰胆碱受体融合蛋白的分子量约37 kD,但主要以包涵体形式存在.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李卓玉	山西大学生物技术研究所	40	126	5.0	9.0
2	王雅梅	首都医科大学实验中心	38	96	6.0	6.0
3	郭晨云	山西大学生物技术研究所	6	48	3.0	6.0
4	霍青虹		1	3	1.0	1.0