抗人肺腺癌单抗5F-11噬菌体抗体库的构建及表达

• 作者: 岳文涛 张春彦 扬学慧 汪惠 湛秀萍 赖百塘
• 来源期刊: 中国肺癌杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 噬菌体展示 抗体库 ScFv 肺腺癌
• 年，卷（期）: 2002,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 119-122
• 页数: 4页
• 分类号: R392.11
• 字数: 2362字
• 语种: 中文

摘要

目的构建抗人肺癌单抗5F-11的噬菌体显示文库.方法利用RT-PCR方法从5F-11杂交瘤细胞扩增抗体轻重链可变区基因,用连接子连接成为ScFv基因后克隆至噬菌体载体pCANTAB5E.以肺腺癌细胞系A2为抗原进行4轮筛选,得到富集的次级噬菌体表达文库.结果制备了库容为8×107 pfu/ml的噬菌体展示文库.随机抽取未经筛选的克隆进行酶切,酶切图谱呈多样性,富集后的酶切图谱则显示特异构型的噬菌体得到富集.检测30个噬菌体克隆上清,其中23个与A2细胞有较强反应.结论本研究获得了抗人肺腺癌单抗5F-11的单链抗体,为拓展抗体的应用创造了条件.