影响人α-突触核蛋白基因在原核细胞中表达因素的研究

• 作者: 李淑婷 陈彪
• 来源期刊: 解剖学报
• 学科: 生物学
• 关键词: α-突触核蛋白 诱导 DH5α大肠杆菌 蛋白表达
• 年，卷（期）: 2002,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 492-495
• 页数: 4页
• 分类号: Q753
• 字数: 4105字
• 语种: 英文
• DOI: 10.3321/j.issn:0529-1356.2002.05.011

摘要

目的研究影响人α-突触核蛋白(α -synuclein)基因在原核细胞中表达的常见因素,以提高其在原核细胞中的表达量. 方法将重组质粒ProEXNACP转化进入到DH5α-大肠杆菌体内,观察诱导剂IPTG浓度、诱导时间、诱导温度、诱导培养基、诱导初始菌浓度及诱导中pH值变化等因素对蛋白表达产量的影响,用SDS-PAGE梯度胶电泳分析,考马斯亮蓝染色进行比较研究, 同时检测pH值,观察其变化. 结果诱导剂IPTG浓度对诱导蛋白产生的影响不大,诱导过程中pH值变化较小,而诱导时间、温度、初始菌浓度和培养基的种类对诱导产生α-突触核蛋白有较大影响.其中,以LB培养基,37℃,180 r/min诱导1～2 h产生α-突触核蛋白的量最大 . 结论诱导剂IPTG诱导ProEXNACP/DH5α大肠杆菌产生α-突触核蛋白的量与诱导时间、温度、初始菌浓度和培养基的种类有明显的关系.初始菌A590 =0.5～0.8,LB培养基,37℃,大通氧量(180 r/min以上),1～2 h诱导可作为大量提取、纯化α-突触核蛋白的首选条件.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈彪	首都医科大学宣武医院神经内科实验室北京老年医学研究所	208	1626	20.0	31.0
2	李淑婷	首都医科大学宣武医院神经内科实验室北京老年医学研究所	26	132	7.0	9.0