压力对大鼠纯化视网膜神经节细胞中Fas/FasL mRNA表达的影响

• 作者: 杜蜀华 胡正 胡竹林
• 来源期刊: 眼科新进展
• 学科: 医学
• 关键词: 视网膜神经节细胞 Fas/FasL 凋亡 TUNEL法 原位杂交 免疫组化
• 年，卷（期）: 2002,（6）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 380-383
• 页数: 4页
• 分类号: Q75|R77
• 字数: 4169字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-5141.2002.06.004

摘要

目的通过检测不同压力及时间纯化培养的大鼠视网膜神经节细胞(retinal gangal cells, RGCs)中Fas/FasL mRNA的表达,探讨Fas/FasL在RGCs凋亡中的作用.方法用SD系大鼠脑源性星型胶质细胞同化培养液双界面法培养羊抗鼠Thy1.1单克隆抗体纯化的SD系大鼠RGCs.分别在0mmHg(对照组) 和20、40、60 and 80mmHg(1kPa=7.5mmHg)的压力下培养24h及48h后,用免疫组化和原位杂交对RGCs中Fas/FasL及其mRNA的变化进行定性及半定量观察; TUNEL法检测各组细胞的凋亡.结果纯化的RGCs培养24h用羊抗鼠FITC-Thy-1.1单克隆抗体进行鉴定阳性,纯度为97%.免疫组化和原位杂交检测Fas/FasL及其mRNA,结果培养24h对照组无表达,20mmHg组有较弱的表达信号,40、60及80mmHg组表达逐渐增强;与对照组比较差异均有显著性(P<0.05);培养48h对照组弱表达,压力≥20mmHg各组较相同压力培养24h各组表达增强,差异有显著性(P<0.05).TUNEL法检测细胞凋亡,培养24h对照组未见细胞凋亡,20mmHg见少量细胞凋亡,随着压力的增高细胞凋亡数增多,凋亡指数增高;与对照组相比均有显著性差异.培养48h组压力≥20mmHg各组较相同压力培养24h组凋亡指数增高,差异有显著性(P<0.05).结论压力可激活视网膜神经节细胞Fas/FasL mRNA表达,Fas/FasL系统活化参与了青光眼高眼压下视网膜神经节细胞的凋亡.