套式PCR检测奶牛粪便中隐孢子虫

• 作者: 周勇志 周金林 张惠英 徐新红 王权 王永康 钱应娟 陈永军
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 套式PCR 隐孢子虫 粪便
• 年，卷（期）: 2002,（6）
• 页码范围: 582-584
• 页数: 3页
• 分类号: S852.73
• 字数: 2254字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0366-6964.2002.06.015

摘要

为了检测样品中的微量隐孢子虫,从含有不同数量隐孢子虫卵囊的奶牛粪便中,直接提取DNA用作初始PCR(Initial-PCR)模板,以稀释的初始PCR的产物为模板进行套式PCR(Nested-PCR),用两对人工合成寡核苷酸分别作为两PCR的引物,扩增大小分别为540pb、258pb的特异片段.PCR产物经电泳鉴定,可从阳性粪便标本DNA抽提物中扩增出目的片段,而阴性对照不能扩增目的片段;初始PCR、套式PCR的敏感小生最低可分别检测到含卵囊100、5个/g粪便.初步应用结果表明某奶牛场的奶牛自然感染率为16.4%.试验表明套式PCR的敏感性比普通PCR约高100倍,能用于奶牛隐孢子虫感染情况的调查.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王权	中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所	65	346	11.0	15.0
2	周金林	中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所	74	410	11.0	17.0
3	周勇志	中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所	48	227	9.0	13.0
4	陈永军	中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所	27	211	10.0	14.0
5	钱应娟	中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所	5	103	4.0	5.0
6	张惠英	中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所	4	99	4.0	4.0