新生猪肾近曲小管上皮细胞的体外培养与鉴定

• 作者: 姚裕家 沈青 熊英 王峥
• 来源期刊: 华西医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 新生猪 肾近曲小管上皮细胞
• 年，卷（期）: 2002,（3）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 440-443
• 页数: 4页
• 分类号: R322.6+1
• 字数: 2930字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-173X.2002.03.035

摘要

目的分离新生猪肾小管上皮细胞进行体外培养,为研究围生期肾小管上皮细胞生物学行为特征提供理论基础.方法采用机械分散结合Ⅴ型胶原酶(0.5g/L)消化的方法纯化肾小管片段,选择含10%的FCS低糖 DMEM培养基,置于5%CO2,37℃孵箱培养.0.25%胰蛋白酶用于肾小管上皮细胞纯化和传代培养.应用细胞形态学(光镜和电镜)、免疫细胞化学(PanCK和CK18单抗)和酶组织化学(酸性磷酸酶和碱性磷酸酶)方法进行肾近曲小管上皮细胞鉴定;用流式细胞术做细胞纯度鉴定.结果出生12～24小时的新生猪肾小球直径为50～70μm,出生 5～6天的肾小球直径为70～98μm .新生猪肾近曲小管上皮细胞体外培养对葡萄糖的需求量不高.培养成功并传 6～8代,肾小管上皮细胞纯度达95%～98%.综合形态学、免疫细胞化学和酶组织化学结果,支持细胞来源于肾单位的近曲小管.结论采用机械分散-酶消化纯化肾小管,0.25%胰蛋白酶纯化肾小管上皮细胞及低糖 DMEM培养新生猪肾近曲小管的方法是可行的.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王峥	四川大学华西第二医院儿科	82	479	12.0	18.0
2	姚裕家	四川大学华西第二医院儿科	87	1010	13.0	29.0
3	熊英	四川大学华西第二医院儿科	141	696	12.0	16.0
4	沈青	四川大学华西第二医院儿科	1	14	1.0	1.0