兔視網膜色素上皮細胞的培養與保存

• 作者: 任佩賢 彭清 成霄黎 王麗聰 趙志宏
• 来源期刊: 美中国际眼科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: RPE細胞 培養 保存 兔 體外
• 年，卷（期）: 2002,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 21-24
• 页数: 4页
• 分类号: R77
• 字数: 3866字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-5123.2002.01.004

摘要

目的探索一種有效的體外分離兔視網膜色素上皮(RPE)細胞的良好方法,并觀察RPE細胞凍存復蘇前後的形態學特黠.方法用兩步酶法分離兔RPE細胞,第一步酶(透明質酸酶+胰蛋白酶),用于鬆解視網膜神經上皮細胞與RPE細胞之間的連接;第二步(胰蛋白酶)用于離散RPE細胞,制成細胞懸液;然後用慢凍速融方法對細胞進行冷凍保存及復蘇,最後用4種方法(RPE片層觀察、H-E染色、免疫組化法及光、電鏡觀察法)觀察RPE細胞在凍存前後的形態特點.結果用此方法分離培養的細胞其結構完整,純度高,收獲量多,在體外生長旺盛,達到鋪滿匯合的時間縮短,同時維持體内細胞的許多生物學和形態學特點.細胞凍存復蘇後的存活率高達80%左右,且與凍存前細胞形態相比未見明顯差别.結論此分離培養方法及凍存復蘇法是高效可行的.