多药耐药基因转染脐血单个核细胞及其表达与功能的体外研究

• 作者: 安淑华 康权 王佚 王珊 许嘉陵 郭春宝 金先庆
• 来源期刊: 中华儿科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 基因,MDR 转染 胎血 白细胞,单核
• 年，卷（期）: 2002,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 690-694
• 页数: 5页
• 分类号: R73
• 字数: 3992字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:0578-1310.2002.11.014

摘要

目的为克服白血病化疗中的骨髓抑制,采用含人多药耐药 (MDR1) 基因全长cDNA逆转录病毒载体转染人脐血单个核细胞,探索一种MDR1基因导入脐血造血细胞稳定、有效的方法,评价MDR1基因转染脐血细胞及其功能的表达,为体内转染MDR1基因保护骨髓免受大剂量化疗药物损伤提供条件.方法采用含有MDR1基因表达质粒pHaMDR1/A的包装细胞PA317传代培养产病毒法,通过浓缩病毒上清液将MDR1基因导入人脐血单个核细胞,应用聚合酶链反应(PCR)方法、免疫组化法、流式细胞学等方法从基因、蛋白质、功能及细胞生物学特性等不同水平检测MDR1基因在脐血单个核细胞的表达、转染率及其与转染时间的关系和功能的表达;转染行为是否影响脐血细胞生物学特性.结果 (1)建立了一种安全可行、稳定高效的MDR1基因体外转染脐血造血细胞的体系和方法;(2)PCR方法证实外源性MDR1基因可有效地在体外整合到脐血单个核细胞中;(3)免疫组化法测得2日、4日、6日转染率分别为18.0%、29.8%、34. 7%;(4)柔红霉素排出试验证实导入的MDR1基因表达产物P-gp有正常的生物学功能;(5)转染后的脐血细胞周期生物学特性无异常.结论 MDR1基因体外转染脐血造血细胞是安全可行的,且在体外有稳定、有效的表达.这一方法为进一步在化疗骨髓保护的体内实验提供了有利的依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	安淑华		87	715	14.0	21.0