膜联蛋白V与碘化丙啶用于细胞周期特异性凋亡的检测

• 作者: 余源 冷彦 周晖 申漫里 覃吉超 陶德定 龚建平
• 来源期刊: 中华检验医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 流式细胞术 细胞周期 膜联蛋白V DNA链缺口标记法
• 年，卷（期）: 2002,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 78-81
• 页数: 4页
• 分类号: R446
• 字数: 2844字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:1009-9158.2002.02.005

摘要

目的建立一种新的细胞周期特异性凋亡检测方法.方法将急性早幼粒细胞白血病细胞株(HL-60)分别经喜树碱(CAM)、紫外线诱导,及喜树碱和N-甲苯磺酰基-L-苯基丙氨酸氯甲基酮(TPCK)共同诱导后,用异硫氰酸荧光素标记的膜联蛋白V(Annexin V)进行标记,进行标记，经1%不含甲醇的甲醛溶液冰浴固定,再用含洋地黄皂苷的碘化丙啶染色液染色后,流式细胞术分析凋亡细胞的周期特异性和细胞凋亡率,并与DNA链缺口标记法(TdT)和常规Annexin V法检测结果进行比较.结果细胞凋亡的周期特异性分析:膜联蛋白V/碘化丙啶法(PA法)和TdT法结果一致,CAM和紫外线诱导的细胞凋亡分别发生在S期和G1期;CAM 和TPCK共同诱导试验显示,PA法对早期凋亡具有较高的检测灵敏度,TdT法则不能有效检测;而常规Annexin V法无法进行凋亡细胞的周期特异性分析.细胞凋亡率的检测:HL-60经CAM、紫外线、CAM与TPCK 三种方法诱导后,PA法检测凋亡率的结果(17.3%、34.7%、35.9%)与常规Annexin V法的检测结果(18.1%、35.6%、37.0%)一致(P>0.05),而TdT法(10.7%、19.5%、-)则明显偏低(P<0.01).结论 PA法可以用于凋亡细胞周期特异性检测,其稳定、可靠、灵敏度高.