鼠透明带3(ZP3)融合蛋白表达以及抗血清制备

• 作者: 张富春 林仁勇 钟哲 钱东 马正海 马纪
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: mZP3 cDNA 质粒GST-mZP3 原核表达 融合蛋白 抗血清
• 年，卷（期）: 2002,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 11-13
• 页数: 3页
• 分类号: Q786
• 字数: 2296字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2002.04.008

摘要

鼠透明带3(mZP3)作为精子的初级受体,是鼠透明带中的一种主要糖蛋白,抗鼠透明带3抗体能够阻断精卵的结合,达到不育的效果,因此mZP3是免疫避孕研究的重要候选抗原.从小鼠卵巢中提取总RNA,分离mRNA,反转录获得cDNA,将cDNA连接到测序载体pUCm-T质粒上,通过序列测定和分析得到正确的mZP3 cDNA.经内切酶EcoR I和XhoI处理,将mZP3 cDNA克隆至融合蛋白表达载体pGEX-4T-1中,在T4 DNA连接酶的作用下构建出融合表达载体pGEX-mZP3,转化大肠杆菌BL-21菌株,利用IPTG诱导后获得可溶性的蛋白质产物,经过SDS-PAGE鉴定,表达的融合蛋白GST-mZP3分子质量约为72kD左右,纯化的融合蛋白免疫兔子,获得效价为1∶1000的抗血清,Western blot检测抗血清具有针对mZP3融合蛋白的专一性,为进一步开展mZP3 的免疫功能检测的研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马正海	新疆大学生命科学与技术学院分子生物学重点开放实验室	57	234	8.0	13.0
2	张富春	新疆大学生命科学与技术学院分子生物学重点开放实验室	286	2034	23.0	31.0
3	马纪	新疆大学生命科学与技术学院分子生物学重点开放实验室	80	657	14.0	23.0
4	林仁勇	新疆大学生命科学与技术学院分子生物学重点开放实验室	3	35	2.0	3.0
5	钱东	新疆大学生命科学与技术学院分子生物学重点开放实验室	3	35	2.0	3.0