摘要:
[目的] 建立大鼠股骨灰分及骨钙含量的测定方法,测定补钙实验动物的股骨钙含量.[方法] 大鼠股骨灰分的测定采用重量法.每份大鼠股骨样品放入一只瓷舟(75 mm)内(事先将瓷舟置马福炉中,于600℃灼烧,冷却后称重,记录空舟重),并将瓷舟并排码放在一片白色瓷砖(150×150 mm)上,再置烘箱中.于105℃烘4~6 h,取出放干燥器内,0.5 h后称重,恒重记录舟+骨重.将载有磁舟的瓷砖叠放(用空磁舟放瓷砖隔出空间)在马福炉中,灰化样品.起始温度200℃,间隔100℃分段升温至700℃止.待炉温降至100℃以下,取出放干燥器内,0.5 h后称重,恒重记录舟+灰重.骨钙的测定采用EDTA滴定法一称0.050 0 g左右骨灰样品于三角瓶中,加1 ml 6 mol/L HCl溶解后加20 ml纯水.滴加2 ml 2 mol/L NaOH调至中性后加1滴10 g/L KCN,2滴0.05 mol/L柠檬酸钠(调pH时,如出现絮状物则用HCl回滴至消失,再加KCN和柠檬酸钠,即可消除Mg等的干扰,使滴定终点明显).摇匀后加2 ml NaOH,1~2滴钙红指示剂,用0.01 mol/L EDTA滴定至红色变纯蓝色即为终点.[结果] 用瓷舟灰化样品的方法,由于节省了空间,一次处理量可达80个样品.大鼠股骨灰分的测定结果为:高剂量组(0.48±0.55)g,n=14;中剂量组(0.47±0.021)g,n=14;低剂量组(0.39±0.021)g,n=14;阳性对照组(0.44±0.054)g,n=14;阴性对照组(0.22±0.046)g,n=12;正常对照组(0.12±0.012)g,n=14.大鼠股骨钙的测定结果为:高剂量组(270.5±31.2)mg/g,n=14;中剂量组(272.6±40.9)mg/g,n=14;低剂量组(235.2±10.2)mg/g,n=14;阳性对照组(225.1±29.0)mg/g,n=14;阴性对照组:(167.8±22.3)mg/g,n=12;正常对照组(199.2±25.6)mg/g,n=14.[结论] 采用瓷舟灰化样品的方法可大大提高工作效率;只要控制调pH的技术关键,EDTA滴定法是测定常量钙较理想的方法.