BALB/c小鼠胚胎干细胞系建立的方法学探讨

• 作者: 孟国良 尚克刚 滕路 薛友纺
• 来源期刊: 遗传学报
• 学科: 生物学
• 关键词: BALB/c小鼠 胚胎干细胞 大鼠心脏细胞条件培养基(RH-CM) 内细胞团(ICM) 二倍体核型
• 年，卷（期）: 2002,（7）
• 页码范围: 581-588
• 页数: 8页
• 分类号: Q813.1+1
• 字数: 7027字
• 语种: 中文

摘要

以小鼠胚胎成纤维细胞(ME)为饲养层,以大鼠心脏细胞条件培养基(RH-CM)为ES细胞培养基,全面、详尽地对BALB/c小鼠ES细胞的建系和培养方法进行了探讨,成功地建立了一套建立和培养BALB/c小鼠ES细胞系的新方法.这一培养条件不但有效地维持了ES细胞的未分化状态和正常二倍体核型,而且维持了其作为多能性胚胎干细胞的一系列特征;实验设计了两种离散方法和两种浓度的消化液,用来离散增殖的ICM和ICM离散后出现的ES集落.两种离散方法即"一次离散法",和"多次离散法",两种浓度的消化液即0.25髎 Trypsin-0.04髎 EDTA和0.05髎 Trypsin-0.008髎 EDTA;同时对ICM离散时机、RH-CM在BALB/c小鼠ES细胞建系和培养中作用进行了探讨.结果表明:在低浓度消化液作用下,采用"多次离散法"离散增殖4天的ICM和ES集落的方法建立BALB/c小鼠的ES细胞系是理想的;从细胞形态、集落形态、增殖生长能力、核型检测、碱性磷酸酶测定以及体内外分化能力表明,所建立的9个BALB/c小鼠ES细胞系符合小鼠胚胎干细胞的一系列特征.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	薛友纺	北京大学生命科学学院	13	286	8.0	13.0
2	尚克刚	北京大学生命科学学院	17	331	9.0	17.0
3	孟国良	北京大学生命科学学院	9	208	6.0	9.0
4	滕路	北京大学生命科学学院	5	177	4.0	5.0