表达幽门螺杆菌hpaA基因的减毒鼠伤寒沙门氏菌对小鼠的免疫保护作用

• 作者: 彭晓忠 朱森林 李国庆 胡品津 陈洁 陈湖
• 来源期刊: 中国人兽共患病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 幽门螺杆菌 hpaA基因 鼠伤寒沙门氏菌 疫苗 小鼠
• 年，卷（期）: 2002,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 32-36
• 页数: 5页
• 分类号: R379.9
• 字数: 4099字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2002.02.008

摘要

目的克隆幽门螺杆菌(H.pylori)全长hpaA基因,构建表达HpaA蛋白的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌,并研究其对小鼠的免疫保护作用.方法用PCR扩增全长hpaA基因,经适当的酶切-连接反应将其连入原核表达质粒pTrc99A,并进行了基因测序.重组质粒经鉴定后再导入减毒鼠伤寒沙门氏菌SL3261,提取重组菌质粒,PCR和酶切鉴定,筛选阳性克隆.用SDS-PAGE电泳和Western blot进行HpaA表达分析和鉴定,用薄层扫描分析HpaA含量.重组菌3×108CFU/0.4ml/只免疫C57BL/6小鼠,4周后H.pylori SS1 105CFU/只攻击小鼠,再5周后处死小鼠,取腺胃做快速尿素酶试验和Giemsa染色,以明确H.pylori定植情况,对照观察免疫保护效果.结果经PCR和酶切证实,构建了含783bp hpaA基因的重组原核表达质粒pTrc99A-hpaA,并将后者成功转化了减毒鼠伤寒沙门氏菌.重组菌能表达约30kDa HpaA蛋白,重组HpaA量约占全菌体蛋白量的38.9%,Western blot证实其有免疫反应性.重组菌对小鼠免疫保护率为43.48% (10/23),与空白对照组比统计差异显著(P=0.01).结论构建了表达H.pylori HpaA 的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌,该菌株对C57BL/6小鼠有免疫保护作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡品津		57	1023	12.0	31.0
2	彭晓忠		5	167	3.0	5.0
3	陈湖		9	241	6.0	9.0
4	朱森林		10	124	7.0	10.0
5	陈洁		11	152	9.0	11.0
6	李国庆		3	24	2.0	3.0