结肠癌患者淋巴结构建抗结肠癌噬菌体Fab抗体库

• 作者: 万田谟 吴保平 周殿元 张亚历 张振书 肖冰 赖卓胜 高春芳
• 来源期刊: 中华消化杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 结肠癌 噬菌体表面呈现 抗体库
• 年，卷（期）: 2002,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 15-18
• 页数: 4页
• 分类号: R73
• 字数: 3239字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:0254-1432.2002.01.004

摘要

目的构建2个结肠癌患者自然致敏淋巴结抗体Fab段噬菌体呈现库.方法取2个结肠癌患者转移淋巴结,提取淋巴结总RNA,逆转录PCR扩增重链Fd和κ轻链cDNA.依次将PCR产物插入载体pComb3的相应部位,噬菌体VCSM13辅助感染.以点印迹检测噬菌体表面Fab的表达.结果所选2种Ig亚类的重链Fd片段、2种κ轻链cDNA得到扩增.Fd片段和κ轻链均插入pComb3的重组率为40%,Fab噬菌体表达库容量达1.48×106.噬菌体悬液的点印迹免疫染色显示有Fab表达.结论构建了2个结肠癌患者自然致敏淋巴结抗体Fab段噬菌体呈现库,为筛选结肠癌相关抗体奠定了基础.